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快速简易防治月季日斑类病毒的方法

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快速简易防治月季日斑类病毒的方法

发布日期:2019-04-08 作者: 点击:

月季日斑类病害原先被认为生理性或遗传病害,,因而很久以来被认为是病毒病,直到1979年才被证明是由类病毒引起的在很多种植月季的国家都有该病的发生,包括澳大利亚、以色列、秘鲁等拉丁美洲国家、南非、南阳及委内瑞拉。

检疫方法

鉴别寄主鉴定:将待测材料嫁接至月季Hass品种的幼苗上,2个月到3年后,嫁接苗木的茎干,子叶上显示黄色、橙色或白色的斑纹或斑点,叶片上有时能显示花斑和扭曲的症状。利用胚胎嫁接或高温培养能加快症状的形成。也可通过一块在部分纯化的病汁液中浸润的刀具切割茎干来接种生物学鉴定方法使用十分普遍,并成功地用来选择无毒地繁殖材料,但该方法的缺点是需要的时间较长。

聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定:ASBVd能从受侵染的显症或隐症的月季树的叶片、叶柄、花芽组织以及茎干提纯到,类病毒存在于叶绿体组份,细胞质和树状月季批发线粒体组份中不存在。提纯方法与其它类病毒相似,先用提取缓冲液温育磨粹的植物组织,酚氯仿抽提释放核酸,后用methoxyethanol抽取以除去植物组织中的多糖,上清液乙醇沉淀,经CF-11纤维素柱纯化即得到类病毒核酸粗提液。此粗提液经聚丙烯酰胺凝胶双向电泳后,环状的类病毒RNA条带与植物组织的RNA分开,环状的RNA具有侵染性,切下特异的类病毒条带,洗脱凝胶,得到高度纯化的类病毒核酸。纯化的核酸通过机械接种至月季品种的幼苗上,观察其出现的症状进一步确认类病毒是否存在。

核酸杂交:由于鉴别寄主症状形成较慢,用标记的互补DNA作探针进行核酸杂交能较容易地鉴定ASBVd,其灵敏度较PAGE法高出1000倍

RT-PCR:根据报道的序列合成专化性的PCR引物进行反转录PCR检测,其灵敏度高,快速简易,能同时处理多个样品,但易产生假阳性。

检疫措施:

禁止从疫区进口月季及其相关的繁殖材料。

防治方法:

利用无毒繁殖材料:能够通过种子传播,种植健康的繁殖材料是有效的防治措施。然而ASBVd在很多月季品种上不表现出症状,树状月季批发因而选育繁殖材料时需用上述方法进行检测。

污染器械的消毒:在无症带毒的田间植株上普遍存在,且易于通过污染的刀具传播至健康的植株,因此,已污染园地农事工具的彻底消毒对该病的防治十分重要。用5%地家用漂白粉(次氯酸钠)、1:1混合的2%的甲醛+2%的NaOH,或者6%的过氧化氢能有效灭活污染器械上的ASBVd(Desjardin等,1987)。

利用无症的耐病品种:认为无症品种被ASBVd侵染后产量损失较小,在疫区可以用来控制该病害。然而,无症的品种可作为ASBVd的初侵染源,对该病害的控制可能会进一步复杂化,因而有必要对此方法的可行性进行深入研究。


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